PMC

Raport de caz

Un bărbat coreean în vârstă de 56 de ani a vizitat departamentul nostru în martie 2009 cu un istoric de 1 an de multiple mase eritematoase cu cruste pe față, gât și antebraț stâng (Fig. 1). Pacientul nu a manifestat niciun simptom, cum ar fi, mâncărime, durere, sensibilitate, febră, scădere în greutate sau transpirații nocturne. La o vizită anterioară la un spital comunitar în 2005, pacientul fusese diagnosticat cu limfom de tip B pe baza rezultatelor unei biopsii chirurgicale efectuate pe un ganglion limfatic mărit la nivelul gâtului. Ulterior, a fost supus la 9 cicluri de CHOP (ciclofosfamidă, adriamicină, vincristină și prednison), care au dus la remisiune clinică. Cu toate acestea, în 2008, pe fața sa au apărut papule roșiatice de dimensiuni mici, care au crescut în dimensiune și au avut o consistență mai fermă decât masele eritematoase inițiale. Ulterior au apărut, de asemenea, leziuni noi în alte zone ale pielii. Diagnosticul său clinic diferențial a fost nedeterminat, dar s-a suspectat o metastază cutanată sau un carcinom cu celule scuamoase. O biopsie cutanată a fost apoi efectuată pe o masă din gât.

Histopatologic, s-a constatat că celulele tumorale bazofile se infiltrau difuz în dermul profund, fără afectare epidermică. Celulele tumorale rotunde de dimensiuni mici și medii conțineau nuclei veziculoși, nucleoli proeminenți și au adoptat un aspect relativ monoton (Fig. 2). Din punct de vedere imunohistochimic, celulele neoplazice au fost pozitive pentru CD3, CD4, CD5, UCHL-1, CD20, CD79a și bcl-2 (Fig. 3). Cu toate acestea, CD10, CD30, CD56, CD68, CD138, granzima B și EBV in situ nu au fost exprimate, deși limfocitele normale au fost pozitive pentru CD8 și TIA-1.

Contul complet al celulelor sanguine, numărul diferențial de celule, analiza de urină și testele funcției hepatice (inclusiv BUN/Cr) au fost normale, precum și frotiul de sânge periferic și o biopsie a măduvei osoase au fost, de asemenea, normale. Tomografia computerizată a evidențiat multiple mase tumorale mărite la nivelul gâtului, cu limfadenopatii la nivelul ganglionilor limfatici interjugulari, submandibulari și submentali.

Am determinat natura acestui caz, în care au fost exprimate atât antigene asociate celulelor T, cât și antigene asociate celulelor B, prin efectuarea de studii PCR multiplex pentru a evalua rearanjarea receptorului gamma al celulelor T (TCR) și a lanțului greu al imunoglobulinei (IgH). În plus, am revizuit histopatologic proba de biopsie prelevată în 2005 dintr-un ganglion limfatic al gâtului și am supus-o analizei imunofenotipice și genotipice.

Pentru analiza genotipică, s-au efectuat 35 de cicluri a două reacții PCR multiplex pentru rearanjamente ale genei TCR gamma pe ADN-ul extras din secțiuni de 8 µm care au fost deparafinate. Amorsele utilizate în Mix 1 PCR au fost: V2(5′-CTT-CCT-GCA-GAT-GAC-TCC-TAC-AAC-TCC-AAG-GTT G-3′), V3(5′-CTT-CCT-GCA-GAT-GAC-GTC-TCC-TCC-ACC-GCA-AGG-GAT-G-3′), V4(5′-CTT-CCT-GCA-GAT-GAC-TCC-TAC-TAC-ACC-TCC-AGC-GTT-G-3′), V8(5′-CTT-CCT-GCA-GAT-GAC-TCC-TAC-AAC-TCC-AGG-GTT-G-3′), V9(5′-GGN-ACT-GCA-GGA-AAG-GAA-TCT-GGC-ATT-CCG-3′), JGT12(5′-AAG-TGT-TGT-TCC-ACT-GCC-AAA-3′), JGT3 (5′-AGT-TAC-TAT-GAC-CTA-GTC-CC-3′), JGT4(5′-TGT-AAT-GAT-AAG-CTT-TGT-TCC-TCC-3′). Amorsele utilizate în Mix 2 PCR au fost: V5(5′-TTC-CTG-CAG-ATG-ACG-TCT-CCA-ACT-CAA-AGG-ATG-3′), V10(5′-CTC-TGC-AGA-ATC-CGC-AGC-TCG-ACG-CAG-CA-3′), V11(5′-CAC-TGC-AGG-CTC-AAG-ATT-GCT-CAG-GTG-GG-3′), V12(5′-ACT-CTG-CAG-CCT-CTT-GGG-CAC-TGC-TGC-TCT-AAA-3′) și aceiași trei amorse de îmbinare. Celulele Jurkat au fost utilizate ca martori pozitivi, iar un eșantion negativ anterior a fost utilizat ca martor negativ. Pentru rearanjamentele genei IgH, s-au efectuat 35 de cicluri de PCR semi-nested pentru segmentul FRIII-J, utilizând primerii FRIIIA(5′-ACA-CGG-CYS-TGT-ATT-ACT-GT-3′), LJH(5′-TGA-GGA-GAC-GGT-GAC-C-3′) și VLJH(5′-GTG-ACC-AGG-GTN-CCT-TGG-CCC-CAG-3′). Primii primeri semi-nested au fost FRIIIA și LJH, iar al doilea primeri au fost FRIIIA, VLJH. Celulele RAJI au fost utilizate ca martori pozitivi și un eșantion negativ anterior a fost utilizat ca martor negativ. Rearanjarea genei TCR gamma a arătat monoclonalitate la aproximativ 200 pb în probele noastre și în probele de biopsie anterioare, dar rearanjarea genei IgH nu a arătat monoclonalitate în niciuna dintre probe (Fig. 4).

Constatările histopatologice ale biopsiei ganglionilor limfatici de la nivelul gâtului efectuate în 2005 au evidențiat prezența celulelor tumorale bazofile de dimensiuni mici până la medii care se infiltrau în mod difuz și care uneori formau noduli multipli și ștergerea arhitecturii normale, care seamănă cu cea observată în proba noastră de piele. Evaluarea imunofenotipică a fost puternic pozitivă pentru CD20 și slab reactivă la UCHL-1 în citoplasma limfocitelor atipice (Fig. 5). În plus, celulele neoplazice s-au dovedit a fi pozitive pentru CD3 și CD4 și negative pentru CD30 (Fig. 6).