Tc99m-sestamibi absorberas snabbare av en hyperfunktionell bisköldkörtel än av en normal bisköldkörtel. Detta beror på flera histologiska egenskaper i själva den onormala bisköldkörteln. Sestamibibibildning är korrelerad med antalet och aktiviteten hos mitokondrierna i bisköldkörtelcellerna, så att bisköldkörteladenom med oxyfila celler har en mycket hög aviditet för sestamibi, medan bisköldkörteladenom med huvudcellsbenägenhet nästan inte har någon bildkvalitet alls med sestamibi. Vissa forskare har också försökt att kvantifiera eller karakterisera bisköldkörtlarnas avbildningsförmåga med hjälp av MDR-genuttrycket. Ungefär 60 procent av adenomerna i bisköldkörteln kan avbildas med sestamibi-scanning. Den naturliga orsaksfördelningen för primär hyperparatyreoidism är ungefär 85 procent solitära adenom, 10-15 procent diffus hyperplasi och 1 procent cancer.
Avbildning är inte lika tillförlitlig hos patienter med multiglandulär bisköldkörtelsjukdom. Dessutom kan storleksbegränsning av den onormala körteln begränsa upptäckten med radionuklidskanning. SPECT-avbildning (tredimensionell), som komplement till plana metoder, kan öka känsligheten och noggrannheten, särskilt i fall av små parathymiska adenom. Genom att använda en gammakamera inom nuklearmedicin kan radiologen fastställa om en av de fyra bisköldkörtlarna är hyperfunktionell, om detta är orsaken till hyperparatyreoidismen. Teoretiskt sett kommer den hyperfunktionella bisköldkörteln att ta upp mer av Tc99m-sestamibi och kommer att synas ”ljusare” än de andra normala bisköldkörtlarna på gammakamerans bilder, särskilt på grund av den interna biofeedback-slingan i kroppen där kalcium i sig självt återkopplar till kalciumreceptorer och hämmar produktionen av bisköldkörtelhormon i de normala bisköldkörtlarna. Ibland måste detta fastställande göras tre eller fyra timmar senare när den aktivitet som tas upp av sköldkörteln och de normala bisköldkörtlarna avtar; den onormala bisköldkörteln behåller sin aktivitet, medan radiofarmakan utlöses ur den normala sköldkörteln. Hos patienter med nodulär struma eller funktionella tumörer i sköldkörteln är ett ökat upptag av sestamibiämnet möjligt och gör lokaliseringen av bisköldkörteln svår eller förvirrande.
Nyare modaliteter som använder samma sestamibi spårämne i mer sofistikerade skannrar, t.ex. SPECT/CT-maskiner, har förbättrat lokaliseringen av adenom i bisköldkörteln, särskilt i ektopiska lägen.