Az emberi fog mikrokeménysége és kémiai összetétele
Maria del Pilar Gutiérrez-SalazarI, II; Jorge Reyes-GasgaI*
ABSTRACT
Az emberi fog keménységét, mind a zománc, mind a dentin esetében, különböző helyeken mérték Vicker-gyémánt segítségével. Ebben a munkában megmutatjuk, hogy ezek az értékek szinte állandóak a zománc és a dentin vastagsága mentén. A behatolásokat a külső zománcfelülettől a belső dentinrétegig, a zománc-dentin határon keresztül végeztük, mind a keresztirányú, mind a hosszanti mintákban. A geometriai jól formázott behúzások egyenletességét fény- és pásztázó elektronmikroszkóppal egyaránt ellenőriztük, a fog kémiai összetételét pedig jellegzetes röntgen energiadiszperzív spektroszkópiával elemeztük. A keménységmérések a zománc esetében 270 és 360 VHN, a dentin esetében pedig 50 és 60 VHN között mozogtak. A nyaki zóna a hosszmetszetben a legalacsonyabb, míg a keresztmetszetben a legmagasabb értéket mutatta. Minden keménységi érték statikusan szignifikáns volt. A túra eredményei azt mutatják, hogy a zománc és a dentin keménysége közötti különbségnek nincs köze a Na-, Cl- és Mg-tartalomhoz, hanem a szerves és szervetlen anyagok százalékos arányához a zománcban és a dentinben.
Kulcsszavak: mikrokeménység, kémiai összetétel, emberi fog, zománc, dentin
1. Bevezetés
A fogzománc az emberi szervezet leginkább mineralizált szövete. Összetétele 96 tömegszázalékban szervetlen anyag, 4 tömegszázalékban szerves anyag és víz. A dentinben a szervetlen anyag 70 tömegszázalékot képvisel. Ezt a szervetlen anyagot főként a hexagonális hidroxiapatithoz kapcsolódó kalcium-foszfát alkotja, amelynek kémiai képlete Ca10(PO4)6-2(OH)1. A zománc és a dentin röntgensugaras energiadiszperzív spektroszkópiai (EDS) elemzése kis mennyiségben más elemek, például Na, Cl és Mg 2 jelenlétét is kimutatta.
Az emberi fogak a rágás során különböző pont-pont nyomásnak vannak kitéve. Ezért a keménységük vizsgálata és elemzése nagyon fontos annak megértéséhez, hogy a rágóterhelés hogyan oszlik meg a fogban, és annak előrejelzéséhez, hogy a fogpótló eljárások, az életkor és a betegségek hogyan változtatják meg a feszültségeket és a terhelést. Ezenkívül a keménységi értékek más mechanikai tulajdonságokkal, például a Young-modullal és a folyáshatárral is összefüggésbe hozhatók3,4. A keménység mérése a fogban azonban nem könnyű. Mivel a zománc2 és a dentin struktúrái – a zománc esetében a zománc-dentin átmenet (EDJ) és a felszín között húzódó prizmák, a dentin esetében pedig egy heterogén kompozit anyag5-7 – könnyen elképzelhető, hogy keménységi értékeik eltérőek, még a zománc és a dentin belsejében is, és hogy kémiailag függnek egymástól.
A keménységvizsgálatnak az intraorális modellekkel együtt nagy jelentősége van a de- és remineralizációs kísérletekben8. Az emberi fog keménységét különböző módszerekkel határozták meg, többek között abráziós9, karcolásos10 és behúzásos technikákkal3,4,11-14. Mivel a zománcban és a dentinben jelentős helyi eltérésekről számoltak be, a mikrokarcolással vagy mikroindentációval végzett módszereket részesítik előnyben, és általában a Knoop gyémánt indentert használják4,8,13,14. A közelmúltban a dentin keménységének mérése során atomerő-mikroszkópiával végzett nanoindentációról számoltak be3.
Knoop (KHN) és Vicker (VHN) keménységmérésekről közel azonos értéket jelentettek15. A zománc és a dentin átlagos keménységértéke 270 és 350 KHN (vagy 250 és 360 VHN), illetve 50 és 70 KHN között van4. Ezen értékek standard eltérései (SD) azonban széles és jelentős eltéréseket mutatnak, bár a dentin esetében ezek az eltérések kevésbé kifejezettek. Így például Craig és Peyton13 a zománc esetében 344 ± 49 és 418 ± 60 VHN közötti keménységről számolt be; Collys és munkatársai14 369 ± 25 és 431 ± 35 között; Wilson és Love16 263 ± 26 és 327 ± 40 között. Az okkluzális zománc mikrokeménysége 359 és 424 VHN között, a nyaki zománcé pedig 227 és 342 VHN között változott14. Ezeket az eltéréseket olyan tényezők okozhatják, mint a szövettani jellemzők, a kémiai összetétel, a minta előkészítése, a terhelés és a behúzási hossz (IL) leolvasási hibája.
Az egészséges emberi zománcban arról számoltak be, hogy a keménységértékek, az ásványianyag-tartalom és a sűrűség fokozatosan csökken a külső felszíntől az EDJ18-22 felé. Konkrétabban, Kodaka és munkatársai19 mérsékelt korrelációt találtak a Vicker-féle keménység és a zománc P-koncentrációja között, de alacsony korrelációt a Ca-val. Jelezték, hogy a VHN értékek, a Ca és a P százalékos aránya szignifikánsan csökkent a külső, középső és belső zománcfelületeken. Más tanulmányok11,19 arról számoltak be, hogy a külső zománcfelület keményebb, mint a belső, és hogy a keménység a külső peremtől az EDJ felé folyamatosan csökken. Gustafson és Kling21 azt javasolta, hogy a zománc keménységének különbségeit a behúzódások irányának változása okozhatja egyetlen fogszakaszon belül. Néhány más vizsgálat13 azonban egyáltalán nem talált különbséget, csak enyhe jeleket arra vonatkozóan, hogy a zománc keményebb a csúcsban és a külső felszínen, mint a nyaki peremen vagy az EDJ-nél, de a különbség kisebb volt, mint a közölt SD, így nem lehet határozott kijelentést tenni.
A dentinre jelentett keménységszámok szintén eltérőek. Mivel a mélyedés mérete a dentin mikroszerkezetéhez viszonyítva nagyobb, ez az eltérés a különböző helyeken a dentincsövek sűrűségének különbségeiből adódhat. Kenney és munkatársai3 egy módosított atomerő-mikroszkópot használva a dentin keménységének mérésére, kimutatták, hogy a hidratált peritubuláris dentin keménysége a helytől független 2,2-2,5 GPa tartományon belül van, míg az intertubuláris dentinben ez a keménység a helytől függött, és az EDJ közelében jelentősen nagyobb volt (0,49-0,52 GPa közötti értékek), mint a pulpa közelében (0,12-0,18 GPa).
Egy másik paraméter, amelyet figyelembe kell venni, az idő. Arról számoltak be, hogy az emberi fogban a keménységi bemélyedések idővel helyreállnak13,22. Általánosságban azonban keveset tudunk arról, hogy e bemélyedések mérete hogyan változik az idő múlásával. Mivel a zománc meglehetősen rideg anyag, úgy tűnik, hogy a mélyedés időfüggése nagyon kicsi vagy elhanyagolható. Dentinben azonban Herkstroter és munkatársai22 azt találták, hogy a bemélyedések egy nap alatt ellazulnak (kisebbek lesznek); ezt követően a bemélyedések statisztikailag már nem változnak. A benyomódás relaxációjának magyarázata lehet a szerves mátrix tartalmának és/vagy az ásványi és szerves mátrix közötti kötésnek a különbsége.
Amint látható, túl sok paraméter játszik szerepet az emberi fogak keménységének elemzésében; ezért ebben a munkában pontos Vickers-keménységértékeket kapunk (minimális SD-vel) a zománcra és a dentinre egészséges fogakban. A keménységmérést statisztikailag befolyásoló paraméterek azonosítása és ellenőrzése érdekében ügyeltünk a minta előkészítési módszerére, a kémiai összetételre a fog teljes hosszában, valamint az indenternek a zománcprizmákkal és a dentin tubulusokkal való relatív orientációjára. A Vickers-keménységi behatolásokat fénymikroszkópiával (LM) és pásztázó elektronmikroszkópiával (SEM) mértük és elemeztük.
2. Kísérleti eljárás
Hét ortodontiai okokból frissen kivont érett, ép premoláris fogat öngyógyító gyantába ágyaztunk (1. ábra). A beágyazott fogakat kereszt- vagy hosszanti irányban metszettük (1. ábra: a, A2) Whiler Mod. gyémántkerékvágóval. Cutto-1. Három fogat az okkluzális felszínnel párhuzamosan metszettünk, a fognyeregtől közel 0,5 mm-re, a fognyeregtől 1,5 mm-re, a középső harmadban és a nyaki harmadban vágva (1. ábra: c, d, e). A többit a fog meziodisztális tengelyére merőlegesen, bucolingálisan metszettük (1. ábra: A1).
A keménységmérést befolyásoló tényezők egyike a minta preparálása, mivel bármilyen dőlés vagy nem sík felület túl nagy IL-t és ezáltal kisebb VHN-értéket eredményezne. Ezért a próbatestek sík felületének előállítása döntő fontosságú ebben az elemzésben. Ezt szem előtt tartva a próbatesteket szilíciumkarbid papírokkal 1200-as számtól 4000-es számig, fokozatosan, vízzel csiszoltuk. A végső polírozást 0,05-ös polírozó timfölddel végeztük egy alacsony fordulatszámú fémipari polírozógépen Buehler, mod. Minimet, a minta enyhe terhelésével. Ezt követően a mintákat három alkalommal, egyenként 5 percig desztillált vízzel tisztítottuk ultrahangos tisztítóberendezésen Bransonic mod. 52.
Vicker-keménységmérést végeztünk egy mikrokeménységmérővel Matsuzawa mod. MHT2 négyzet alapú, 136°-os szöget bezáró gyémánt indenterrel. Ez a mérőműszer 400 ×-es nagyítású, nagy felbontású és kontrasztú fénymikroszkóppal rendelkezik. A bemélyedéseket 20 másodperces süllyedési sebességgel és 10 g, 25 g és 50 g terheléssel végeztük, és soha nem közelítettük meg a próbadarab egyik szélét vagy egy másik bemélyedést. A két egymást követő bemélyedés közötti legkisebb távolság nagyobb volt, mint 40 mm. A fog egy adott helyén készített bemélyedések száma a fogzománc és a dentin vastagságától függött az adott szinten. Ezért ez a szám nagyobb volt a bütyökzónában, mint a nyaki zónában (2. ábra). A bemélyedés elfogadásának kritériumai a következők voltak: az átlós élek élessége, az átlós forma (geometria) egységessége és a vizsgálati terület szabálytalanságoktól való mentessége. A hosszanti mintákban a behúzásokat a zománc külső felszínétől a dentin belső felszínéig végeztük, EDJ-n keresztül haladva öt zónában: nyaki, középső harmad, csúcs, barázda és az okkluzális zónával párhuzamosan (2. ábra). A transzverzális mintákban bucolingualis és meziodisztális irányban végeztük őket (1. ábra: A2).
A négyzet alakú bemélyedés (IL) tengelyeinek hosszát vagy a keménységmérő okulárjára szerelt mikrométeres skálával, vagy más fénymikroszkóppal (LM), vagy SEM-mel olvastuk le. A VHN-értéket táblázatokból kaptuk. Mind az IL, mind a VHN esetében kiszámítottuk az átlagértéket és az SD-t. A Kappa-statisztikát használtuk az IL leolvasásánál a megfigyelő hibájának megbízhatóságának értékelésére. A Kappa érték 0,90 volt. A hibák csökkentése érdekében ugyanaz a megfigyelő végezte a leolvasást. A megfigyelésekhez a Zeiss Axiotech LM és a Jeol 5200 SEM mikroszkópot használták. Az eredményeket az átlós behúzási hosszértékek összehasonlításával elemeztük a varianciaanalízis ANOVA segítségével. Az EDS kémiai elemzéshez egy Philips XL30 SEM-et használtunk, NORAN-EDS detektorral.
3. Eredmények
A 3. ábra mutatja az emberi fogakban keletkező néhány fő behúzási szabálytalanságot, amikor néhány kísérleti paraméter nem megfelelő; ezek azt jelzik, hogy a minta előkészítési módszere, vagy a terhelés, és/vagy a behúzás helyzete nem a megfelelő. Ezen szabálytalanságok bármelyike lehetővé teszi az IL helyes mérését, ezért ebben a munkában, ha ezek valamelyikét észlelték, a mintát nem használták keménységmérésre. Valójában e szabálytalanságok bármelyikének megfigyelése elegendő volt a vizsgált minta előkészítésének és kísérleti eljárásainak újraellenőrzéséhez.
A 4. ábra a keménységmérés összes követelményét lefedő VHN bemélyedések alakját mutatja. A 4a. ábra egy példát mutat a teljes fogvastagságon keresztül előállított bemélyedésekre egy csúcsos hosszmintán. A 4b. ábra a zománcban, míg a 4c. ábra a dentinben keletkezett mélyedések egy részét mutatja. A 4b. és a 4c. ábrán a nagyítás azonos, így a zománc és a dentin keménysége közötti különbség egyértelmű. A 4. ábra lehetővé teszi a benyomódás mérete és a zománcprizmák mérete közötti összehasonlítást is: ez 25 mm2 -es benyomódási területet jelez.
A 3. ábrán láthatóhoz hasonló benyomódások elkerülése érdekében tökéletesítették a mintaelőkészítési módszert, és 10 , 25 és 50 g-os terheléssel végezték el az elemzést. Az azonos zónában ezekkel a terhelésekkel előállított IL átlagértékei és a hozzájuk tartozó VHN-értékek az 1. táblázatban láthatók. Figyelembe véve az SD-t minden esetben, a VHN-értékek hasonlósága az elemzett zónában egyértelmű. A 10 és 50 g-os terhelések SD értékei azonban nagyobbak, mint a 25 g-os terheléseké.
Collys et al.14 50 g-os terhelést javasolt a fogkeménység vizsgálatához, mert szerintük az alacsonyabb terhelések befolyásolják a behúzás méretét. Két szempontot jelöltek meg ennek a terhelésnek a befolyásolására: 1) a minta felülete a polírozási folyamat során megváltozik, ami nagyobb bevonatot eredményez, mint a behatolásmérő által elért legnagyobb mélység; és 2) kisebb terheléssel nő a behatolásjelek leolvasásának nehézsége. Ebben a munkában azonban a követett mintaelőkészítési módszer után nem tapasztaltunk semmilyen bevonatréteget; annak ellenére, hogy a zománc és a dentin szerkezete mindig megfigyelhető (4. ábra). Az alkalmazott négyzet alapú gyémánt indenterrel elért mélység megközelítőleg 2 mm volt. Ezenkívül 50 g-os terhelés mellett majdnem minden behatolás törést és anyagfelhalmozódást mutatott, mint például a 3. ábrán láthatóak. A 10 g-os terhelésnél a bemélyedések nagyon nehezen voltak olvashatók.
A 25 és 50 g-os terheléssel kapott keménységi értékek statisztikailag hasonlóak voltak, de a 25 g-os terhelés kevesebb törésre utaló jelet és jobb benyomódásformákat eredményezett. Ezért az 1. táblázat elemzése után és a fentiek figyelembevételével a keménységmérésekhez a 25 g-os terhelést választották. Alkalmanként néhány enyhe törést figyeltek meg a ligetes zóna külső szélén (4. zóna) és a középső harmadban (2. zóna), közel a vestibuláris felülethez, de a többi zónában nem. A terhelés alkalmazásának ideje egy másik paraméter, amelyet vizsgáltunk. McColm23 jelezte, hogy a 15-30 s meglehetősen ajánlott a kerámiaanyagok esetében. Ezért ebben a vizsgálatban a 25 g-os terhelést 20 s alatt alkalmaztuk.
A 2. ábra az emberi fog különböző szintjeit mutatja, ahol a Vicker-féle keménységi bemélyedéseket végeztük. A 2. táblázat a 25 g terheléssel kapott főbb VHN-értékeket mutatja a különböző vizsgált fogzónáknál. A táblázatból kiderül, hogy az okkluzális résszel párhuzamos keresztmetszetnek megfelelő zóna (5. zóna) mutatta a legnagyobb keménységi értékeket, míg az 1. zóna (nyaki zóna) a legkisebbeket. Megjegyzendő azonban, hogy az SD-értékeket figyelembe véve az 1. és az 5. zóna közötti keménységkülönbség minimális. A 3. táblázat a különböző vizsgált zónákból kapott főbb VHN-értékeket mutatja. Itt megfigyelhetjük, hogy a keménység a zománcban magasabb, mint a dentinben, ahogyan az várható volt, de a keménység szinte állandó marad minden zománc-, illetve dentinvastagságban. Csak az EDJ közelében van egy rés, ahol a zománc értékéről a dentin értékére csökken.
A kapott adatok alapján a legkisebb VHN-értékkel rendelkező zóna a 2. zóna (a középső harmad), míg a legnagyobb az 5. zóna (az okklúzióval párhuzamos) volt. Általánosságban elmondható, hogy a keresztmetszeti mintákban a bemélyedések könnyebben leolvashatók voltak, nagyon jó alakúak és minimális törésnyomot mutattak. Ezzel szemben a hosszmetszetben a bemélyedések a törésre utaló jeleket mutattak, különösen a 2. zóna bemélyedései. Statisztikailag az ANOVA segítségével kapott eredmények szignifikáns különbségeket mutattak (p > 0,05) az 5. zóna és a többi zóna között. Ebből az a következtetés vonható le, hogy az 5. zóna mutatta a szignifikánsan nagyobb keménységi értéket, míg az 1. zóna a legkisebbet.
A kémiai EDS-elemzés azt mutatta, hogy a Ca/P viszony nagyobb volt a zománcban, mint a dentinben. A zománcban ez 1,63 körül volt, míg a tiszta hidroxiapatitban 1,67; vagyis több Ca volt, mint P (4. táblázat). Na, Cl és Mg is kimutatható volt24 (5. ábra). Általánosságban elmondható, hogy a zománcban a Na és a Mg a zománc külső felszínén mutatott minimumot, de folyamatosan növekedett az EDJ eléréséig. A Ca és a P szinte állandó maradt a zománc teljes vastagságában. A Cl nagyobb mértékben volt kimutatható a zománc külső felszínén, mint az EDJ-ben. A dentinben a Ca/P arány 1,5 körül volt (4. táblázat); azaz a zománcban több P volt, mint a dentinben; a Cl nem mutatkozott, az Mg az EDJ-től a belső felszín felé nőtt, a Na pedig csökkent ezeken a helyeken (5. ábra). Érdemes megjegyezni a C és O viselkedését is: a dentinben a C és O aránya magasabb, mint a zománcban. Ez arra utal, hogy a dentinben a szerves anyag tömegszázaléka nagyobb, mint a zománcban, mint az köztudott.
4. Megbeszélés
Eredményeink szerint a fogak keménységének vizsgálatában a Vicker-féle indenter hasznosabb, mint a Knoop-féle, mert a négyzet alakot mindig meg kell őrizni; és a külső felület és az EDJ közelében a bemélyedések átlóinak kis megnyúlása, amely hibát okoz a keménységmérésekben, könnyen kimutatható. Ezért azt javasoljuk, hogy a fogak keménységének vizsgálatakor mindig a Vicker-féle behatolót kell használni.
A 2. és 3. táblázat szerint statisztikailag nem találtunk szignifikáns keménységkülönbséget a vizsgált hangfogminták azonos zónájában, hanem csak magának a fognak a különböző zónái között. A keménységértékeket a zománc esetében 270 és 360 VHN, a dentin esetében pedig 50 és 60 VHN között találtuk; a különbségek az értékelt zónától függenek. Ezek az eredmények hasonlóak a Craig és Peyton13 által közöltekhez, de esetünkben ezek a VHN-értékek a zománc és a dentin vastagsága mentén minden értékelési zóna esetében állandóak. Összefoglalva, a keménység enyhe növekedését figyeltük meg az 1. zónától az 5. zónáig; vagyis a nyaki zónától a hosszmetszetben a keresztmetszethez, az okkluzálisan párhuzamosan.
Néhány szerző21 a 2. táblázatban közöltekhez hasonlóan a fog külső felszínétől a keménységnek az EDJ-hez közeli helyekhez viszonyított bizonyos eltéréseit jelezte, de ők is az SD-értékek szignifikáns növekedését kapták. Annak ellenére, hogy nagyobb VHN-értékekről számoltak be a külső felületről, mint az EDJ-ről, ami azt jelzi, mint Gustafson és Kling21 , hogy a keménységben mutatkozó különbségeket a külső felületen lévő prizmák ráncos szerkezete okozza. Ebben a munkában statisztikailag a keménységértékek a zománc, illetve a dentin vastagsága mentén állandóak maradtak, és csak az EDJ közelében változtak meg természetes okokból: az EDJ előtt és után van egy körülbelül 20 mm-es rés, ahol a behatolás alakja a 3. ábrán jelzett szabálytalanságok egy részét mutatja. Ez alacsonyabb keménységi értékeknek ad helyet, mint amilyenekről ők számoltak be. Úgy döntöttünk, hogy ezeket az értékeket nem vesszük be a méréseinkbe, mert nem feleltek meg a Vicker-keménységelemzéshez elfogadható összes követelménynek.
Egyértelmű, hogy a zománc és a dentin közötti VHN-különbség a szerves és szervetlen anyagtartalom különbségéből adódik, mint az közismert. Eredményeink szerint azonban a zománcban és a dentinben talált VHN-t önmagában nem befolyásolja a Na, Cl és Mg mellékelemek jelenléte, ahogyan azt egyes szerzők jelezték18-22 , hanem csak a mineralizáció százalékos aránya ezekben a szövetekben.
5. Következtetések
A fog Vicker-keménységének értékei statisztikailag nem mutatnak változást a külső zománcfelülettől az EDJ-ig, illetve az EDJ-től a belső dentinfelületig; a vizsgált zónában a zománc és a dentin vastagsága mentén végig állandóak maradnak. A keménység csak a keresztmetszet mentén nagyobb, mint a hosszmetszet mentén, és az 1. zónától az 5. zónáig kissé nagyobb. A zománc és a dentin közötti VHN-különbség a bennük lévő mineralizáció százalékos arányából adódik.
Megjegyzések
3. Kinney, J.H.; Balooch, M.; Marshall, S.J.; Marshall. G.W.; Weihs, T.P. Archs Oral Biol., v. 41, p. 9-13, 1996.
4. Meredith, N.; Sherriff, M.; Setchell, D.J.; Swanson, S.A.V. Archs, Oral Biol. v. 41, p. 539-545, 1996.
5. Marshall, G.W. Quintessence Int. v. 24, p. 606-617, 1993.
6. Fosse, G.; Saele, P.K.; Eibe, R. Acta Odontol. Scand, v. 50, p. 201-210, 1992.
7. Garberoglio, R.; Brannstrom, M. Archs Oral Biol., v. 21, p. 355-362, 1976.
8. Stephen, N.; Wei, H.Y.; Koulourides, V. J. Dent. Res., v. 51, p. 648-651, 1972.
9. Taketa, F.; Perdue, H.S.; O’Rourke, W.F.; Sievert, H.W.; Phillips, P.H. J. Dent. Res., v. 36, p. 739-742, 1957.
10. Totah, V.P. J. Dent. Res., v. 21, p. 99-104, 1942.
11. Caldwell, R.C.; Muntz, M.L.; Gilmore, R.; Pigman, W. J. Dent. Res., v. 36, p. 732-737, 1957.
12. Sweeney, W.T. J. Dent. Res., v. 21, p. 303-310, 1942.
13. Craig, R.G.; Peyton, F.A. J. Dent. Res., v. 37, p.661-668, 1958.
14. Collys, K.; Slop, D.; Cleymaet, R.; Coomanss, D.; Michotte, Y. Dent Mater., v. 8, p. 332-335, 1992.
15. Ryge, G.; Foley, D.E.; Fairhurst, C.W. J. Dent. Res. v. 40, p. 1116-1121, 1961.
16. Wilson, T.G.; Love, B. Am. J. Orth. and Dentofacial Orthop, v. 107, p. 379-381, 1995.
17. Gaspersic, D. J. Oral Pathol. Med., v. 24, p. 153-158, 1995.
18. Robinson, C.; Weatherell, J.A.; Hallsworth, A.S. Caries Res., v. 15, p. 70-77, 1981.
19. Kodaka, T.; Debari, K.; Yamada, M.; Kuroiwa, M. Caries Res., v. 26, p. 139-141, 1992.
20. Davidson, C.L.; Hoekstra, I.S.; Arends, J. Caries Res., v. 8, p. 135-144, 1974.
21. Gustafson, G.; Kling, O. Odontol. Tskr., v. 56, p. 23-30, 1948.
22. Herkströter, F.M.; Witjes, M.; Ruben, J.; Arends, J. Caries Res., v. 23, p. 342-344, 1989.
23. McColm, I.J. Introduction and overview in ceramic hardness, Plenum Press, New York, 1990.
24. Robinson, C.; Weatherell, J.A.; Hallsworth, A.S. Caries Res., v. 15, p. 70-77, 1981.