Po absolvování Jihozápadní texaské státní univerzity v San Marcosu v Texasu nastoupil Boothe do repertoárové společnosti Oregonského shakespearovského festivalu, kde ztvárnil role ve hrách Jindřich IV., 2. část (představitel anglického krále Jindřicha IV.), Troilus a Kressida a dalších. Na newyorském jevišti debutoval v roce 1974 v inscenaci Richarda III. v Lincolnově centru. O pět let později debutoval na divadle Broadway hlavní rolí v jednoaktovce Lone Star, kterou napsal James McLure.
Boothe na sebe poprvé upozornil v roce 1980, kdy hrál Jima Jonese ve filmu televize CBS Guyana Tragedy: Příběh Jima Jonese. Bootheho ztvárnění šíleného vůdce sekty získalo uznání kritiky. V reportáži časopisu Time o této inscenaci byl Boothe pochválen: „Je tu jeden mimořádný výkon. Mladý herec jménem Powers Boothe vystihl veškeré charisma a zlo ‚táty‘ Jima Jonese.“ Boothe za svou roli získal cenu Emmy, když porazil veterány Henryho Fondu a Jasona Robardse. Protože na podzim roku 1980 stávkovala herecká asociace Screen Actors Guild, byl jediným hercem, který překročil pikety, aby se zúčastnil slavnostního ceremoniálu, a tehdy řekl: „Tohle je možná buď nejodvážnější okamžik mé kariéry, nebo nejhloupější.“
Boothe v 80. letech ztvárnil Philipa Marlowa v televizním seriálu na motivy povídek Raymonda Chandlera pro HBO. Objevil se ve filmech Southern Comfort, A Breed Apart, Red Dawn, The Emerald Forest, Rapid Fire a Extreme Prejudice a ve filmech HBO Into the Homeland a By Dawn’s Early Light. Kromě toho se objevil v roce 1990 ve filmu televize CBS Rodina špiónů, kde hrál zrádného námořního důstojníka Johna Walkera. Boothe ztvárnil Kudrnatého Billa Brociuse v úspěšném westernu Tombstone z roku 1993, neloajálního vyššího armádního důstojníka ve filmu Modré nebe (po boku Jessicy Langeové, která za svůj výkon získala Oscara) a zlověstného hlavního teroristu ve filmu Náhlá smrt. Byl také součástí velkého hereckého ansámblu ve filmech Olivera Stonea Nixon (jako náčelník štábu Alexander Haig) a U Turn (jako městský šerif).
V roce 2001 si zahrál Flavia Aëtia, římského generála pověřeného zastavením invaze Hunů v televizní minisérii Attila. Boothe si zahrál hlavní roli majitele nevěstince Cy Tollivera v seriálu HBO Deadwood a zapšklého senátora Roarka ve filmu Sin City (2005) i v jeho pokračování Sin City: A Dame to Kill For (2014). Je hlasem jedné z postav ve videohře Area 51 z roku 2005 a Gorily Grodda, hyperinteligentního telepatického superpadoucha ve filmech Justice League a Justice League Unlimited. V roce 2008 namluvil padoucha Kanea ve videohře Turok.
Byl speciální hostující hvězdou v seriálu 24, kde hrál viceprezidenta Noaha Danielse. Vrátil se v prequelu sedmé série, 24: Redemption. Těsně po převzetí role zastupujícího prezidenta je Boothe viděn, jak vychází z Air Force Two se stíhačkami F-15 v pozadí. Boothe hrál sestřeleného pilota F-15 ve filmu Rudý úsvit. V březnu 2008 namluvil televizní reklamu pro prezidentskou kampaň senátora Johna McCaina.
V roce 2012 se Boothe objevil ve filmu Josse Whedona The Avengers v utajené roli stínového vládního nadřízeného S. McCaina.H.I.E.L.D.u. V letech 2015-16 si tuto roli, nyní pod jménem Gideon Malick, zopakoval v seriálu ABC Agents of S.H.I.E.L.D.
Boothe se v roce 2012 objevil v minisérii Hatfields & McCoys jako soudce Valentine „Wall“ Hatfield. Boothe byl také obsazen do role Lamara Wyatta v hudebním dramatickém seriálu stanice ABC Nashville. Boothe také propůjčil svůj hlas do videohry Hitman: Absolution, kterou v roce 2012 vytvořila společnost IO Interactive, kde namluvil postavu Benjamina Travise.