- Abstract
- 1. Introdução
- 2. Materiais e Métodos
- 2,1. Modelo Animal
- 2,2. Aprovação Animal
- 2.3. Materiais de enxerto ósseo
- 2.3.1. Auto-enxerto
- 2.3.2. Allograft
- 2,4. Desenho do estudo
- 2,5. Procedimentos Cirúrgicos
- 2,5,1. Ovariectomia (OVX)
- 2,5,2. Defeito Proximal de Tíbia
- 2,6. Micro-CT Scanning e Microarchitectural Analysis
- 2,7. Histologia e Histomorfometria
- 2,8. Análise estatística
- 3. Resultados
- 3,1. Observação Animal
- 3.2. Propriedades Microarquitetônicas Tridimensionais
- 3.2.1. Indução da Osteoporose em Ratos
- 3.2.2. Alterações Microarquitectónicas com Auto-enxerto e Tratamentos Alograft
- 3.3. Histologia e Histomorfometria
- 3.3.1. Histologia
- 3.3.2. Histomorfometria
- 4. Discussão
- 5. Conclusão
- Dados disponíveis
- Conflitos de interesse
- Conhecimento
Abstract
Introdução. No campo da cirurgia ortopédica, o uso de material osteogênico em defeitos maiores é essencial. Auto-enxerto e aloenxerto são ambos métodos conhecidos, e acredita-se que o auto-enxerto seja a melhor escolha. Mas o auto-enxerto está associado a procedimentos invasivos adicionais que podem revelar-se difíceis em pacientes frágeis e podem causar efeitos colaterais locais após a colheita dos ossos. Para propósitos viáveis, o uso do aloenxerto está aumentando e comparando eficácias, e as diferenças entre o auto-enxerto e o aloenxerto são essenciais para o resultado clínico dos pacientes. Método. Foram incluídas 24 ratas marrons norueguesas, 12 ratas normais e 12 induzidas com osteoporose (OP). A indução de OP foi verificada in vivo por fração de volume ósseo (BV/TV) aos 90 dias após a ovariectomia (OVX). A cirurgia primária em cada rato consistiu de um orifício de mm na tíbia proximal, bilateralmente. O auto-enxerto e o aloenxerto foram alocados aleatoriamente nas tíbias direita e esquerda. Após uma observação de 21 dias, os ratos foram sacrificados. Amostras de tíbia foram colhidas, micro-CT digitalizadas para indução óssea e propriedades microarquitetônicas, e depois incrustadas para histologia. Resultados. A indução de OP foi verificada três meses após o OVX por uma redução de 68,5% no osso trabecular BV/TV, em relação ao osso normal. A análise microarquitetural e a histologia não mostraram diferenças significativas nas capacidades de formação óssea entre o auto-enxerto e o aloenxerto em osso normal ou osteoporótico após 3 semanas. Conclusão. Este estudo não demonstrou qualquer diferença entre o auto-enxerto e o aloenxerto em um modelo normal ou osteoporótico de tíbia de rato após 21 dias, sugerindo que o aloenxerto é uma boa alternativa ao auto-enxerto.
1. Introdução
Perda e defeitos ósseos podem ser causados por trauma, infecções, ou após artroplastias. Eles são categorizados como um dos maiores desafios clínicos na cirurgia ortopédica. Cirurgia de implante é o termo geral e inclui uma grande parte das cirurgias de intervenção como a reparação de defeitos ósseos em cirurgia ortopédica, neurocirurgia, especialidades bucais e maxilofaciais. Estima-se que essas cirurgias sejam realizadas mais de 2 milhões de vezes por ano e, por isso, têm um alto impacto nos pacientes e no resultado econômico .
Osso auto-enxerto é considerado como um material “vivo” com propriedades osteogênicas, osteoindutoras e osteocondutoras e deve proporcionar o melhor tratamento, onde o aloenxerto consiste em osso “morto” inativo com propriedades principalmente osteocondutoras . No entanto, a colheita de osso auto-enxerto é um procedimento invasivo adicional, e a quantidade disponível é muitas vezes insuficiente. O auto-enxerto colhido do osso da crista ilíaca é denominado enxerto ósseo autógeno de crista ilíaca (AICBG) . Este procedimento pode estar associado a morbidades, tais como perda de sangue, dor no local do doador, risco de infecções e lesões nervosas. As taxas de falha nas cirurgias de auto-enxerto ósseo demonstraram ser 50% causadas por diferentes tipos de colheita, manuseio, método de implantação utilizado e diferenças entre as condições do paciente e a vitalidade óssea. Devido a estas complicações e custos elevados, o material ósseo alógeno é frequentemente utilizado como material de enxerto alternativo. O osso alógeno é colhido convenientemente sem efeitos colaterais de outros pacientes. Mas este material de enxerto tem principalmente efeito osteocondutor e tem os riscos potenciais de transmissão de doenças, infecções bacterianas, resposta auto-imune do hospedeiro e não uniões do hospedeiro do enxerto. Estes efeitos secundários são mais graves, mas são, no entanto, extremamente raros. Teoricamente, o tratamento mais gentil é o aloenxerto. Com o aumento de pacientes idosos e frágeis, é essencial adquirir conhecimento comparando-os em um modelo de defeito relevante, tanto em estruturas ósseas regulares quanto frágeis. Uma alternativa para diminuir a necessidade de colheita de enxerto ósseo vivo é o substituto . A abordagem tem sido ampla desde o uso de células-tronco de diferentes tecidos até combinações com fatores de crescimento em modelos animais e clínicos . No entanto, nenhum substituto mostrou um efeito estável para substituir todos os procedimentos que utilizam o auto-enxerto e o aloenxerto na clínica.
Osteoporose é uma doença em ascensão relacionada com a idade e é um grande problema de saúde pública relacionado com o aumento da idade da população e, por este meio, uma prevalência crescente e um custo global de tratamento de 20-30% em 2030 . A osteoporose é uma doença óssea com redução acentuada da densidade mineral óssea. É causada pelos osteoclastos (OC) que reabsorvem mais osso que o osteoblasto (OB), perturbando a estabilidade da unidade remodeladora óssea (BMU), o que leva a um desequilíbrio entre a reabsorção e formação óssea e eventualmente à perda óssea . Isso afirma a importância da utilização de modelos verificados e do teste de estruturas ósseas normais e frágeis para a melhor correlação clínica, a fim de melhorar a correlação com a situação relevante.
Até aqui, há um conhecimento limitado sobre as diferenças entre o auto-enxerto e o aloenxerto na reparação de defeitos ósseos.
Este estudo tem como objetivo investigar os efeitos do auto-enxerto e do aloenxerto na reparação de defeitos tibiais in vivo, tanto em ratos normais como em ratos osteoporóticos. Particularmente, as alterações microarquitetônicas longitudinais in vivo no pós-operatório, aos 7 dias, 14 dias e 21 dias. A avaliação foi realizada com microtomografias em todos os pontos do tempo e avaliação histomorfométrica após eutanização aos 21 dias. O objetivo primário foi avaliar a formação óssea entre o auto-enxerto e o aloenxerto. O objetivo secundário foi verificar a indução da osteoporose 90 dias após a retirada dos ovários. Foi levantada a hipótese de não haver diferenças na reparação dos defeitos entre o auto-enxerto e o aloenxerto, tanto em ratos normais quanto nos osteoporóticos, o que pode ajudar a reduzir clinicamente o uso do auto-enxerto em modelos com defeito, tanto em estruturas ósseas normais quanto frágeis, e diminuir a necessidade de procedimentos invasivos adicionais de colheita.
2. Materiais e Métodos
2,1. Modelo Animal
Vinte e quatro ratos noruegueses pardos (BN/SsNOlaHsd) foram incluídos no estudo. Tanto os ratos normais quanto os osteoporóticos tinham 4 meses de idade com peso médio de g. Foram alojados e aclimatados 2 meses antes da cirurgia no Laboratório Biomédico da Universidade do Sul da Dinamarca. O ambiente controlado tinha temperatura de 21-28°C, umidade de 40-60% e luzes acesas entre 6h e 18h, com acesso a água esterilizada e dieta normal ou Ca-deficiente ad libitum, respectivamente. As gaiolas tinham piso de serradura e material de cama. Os animais eram observados todos os dias por mudanças de comportamento ou sinais de desconforto, quer pelos técnicos animais quer pelo pesquisador.
2,2. Aprovação Animal
Todos os procedimentos experimentais foram realizados de acordo com as diretrizes da Pesquisa Animal Dinamarquesa. Este protocolo experimental foi aprovado pela Danish Animal Experiments and Inspectorates (no. 2011/561-1959). Este artigo segue as diretrizes da Pesquisa com Animais: Relato das diretrizes do In Vivo Experiments (ARRIVE).
2.3. Materiais de enxerto ósseo
2.3.1. Auto-enxerto
O material de auto-enxerto ósseo foi colhido da tíbia bilateral de rato durante o processo de perfuração da cirurgia do defeito da tíbia. O osso foi tratado estéril, e os chips foram de aproximadamente 0,5-1mm. No preenchimento do defeito da tíbia, o osso normal teve volume suficiente do procedimento de perfuração para preencher a lacuna. No entanto, para os ratos osteoporóticos, o defeito necessitava de enchimento adicional por material ósseo das vértebras da cauda. Para os ratos osteoporóticos, foi adquirido material ósseo adicional a partir das vértebras da cauda. Com uma pequena incisão distal de 2 mm da fixação da cauda ao corpo, os tecidos moles foram removidos por equipamento cirúrgico e seccionados em cavacos. A necessidade de osso adicional foi devida à perda acentuada da densidade mineral óssea após a indução osteoporótica. Este método é bem conhecido pela colheita de osso autólogo no modelo de rato .
2.3.2. Allograft
Este método foi produzido a partir de uma fêmea norueguesa saudável de ratazana castanha. Foi eutanizada com pentobarbital de acordo com as diretrizes, e os côndilos do fêmur, tíbia e úmero foram colhidos em condições estéreis. Os tecidos moles adicionais foram cuidadosamente removidos. O osso foi preparado por moinho de ossos (Ossano Scandinavia ApS, Estocolmo, Suécia). A estrutura óssea trabecular foi dividida em lascas com diâmetro de 0,5-1mm e armazenada a 80°C. Antes do uso, o osso congelado foi descongelado por 30 minutos e adicionado por padrões cirúrgicos ao defeito. Todos esses procedimentos foram realizados sob condição asséptica na sala de cirurgia de pequenos animais do Laboratório Biomédico da Universidade do Sul da Dinamarca.
2,4. Desenho do estudo
Foi utilizado um desenho de estudo longitudinal pareado, com um grupo controle e um grupo intervenção em cada osso tibial. Um total de 24 ratos noruegueses consanguíneos (BN/SsNOlaHsd) fêmeas foram divididas em dois grupos de 12 cada no osso normal e osteoporótico. Autoenxerto e aloenxerto foram cegados e alocados aleatoriamente no defeito tibial direito e esquerdo e, além disso, cegos na fase de avaliação (Figura 1). Nas 13 semanas anteriores à cirurgia da tíbia, 12 ratos receberam uma ovariectomia (OVX) para a indução da osteoporose. O material do aloenxerto foi descongelado 30 minutos antes do uso e o auto-enxerto foi preparado e coletado sob anestesia para a cirurgia primária do defeito da tíbia proximal. Nos dias 0, 7, 14 e 21 do pós-operatório, foram realizadas microtomografias para avaliação contínua. No sacrifício, foram colhidas amostras de defeito proximal da tíbia bilateral para histologia e histomorfometria.
2,5. Procedimentos Cirúrgicos
2,5,1. Ovariectomia (OVX)
A parte de trás do rato foi raspada e desinfectada com iodo e etanol (70%). Uma incisão brusca de aproximadamente 1 cm foi feita sobre a parte caudal do dorso e dissecada de forma romba até a fáscia. Pela penetração da cavidade, o ovário foi colhido com uma pinça, e a ligadura foi feita ao lado do ovário com sutura de 5,0 ethilon e removida. A ferida foi fechada em duas camadas. Todas as operações foram realizadas na mesma hora do dia e no mesmo local. No pós-operatório, os ratos foram analgesizados com buprenorfina (Temgesic, RB Pharmaceuticals Limited, Berkshire, UK), 0,2 ml/100 g de peso corporal s.c. em intervalos de 8 horas para os 3 dias seguintes. Após a ovariectomia, os ratos receberam uma dieta especial com baixo teor de cálcio e água ad libitum. A indução da estrutura óssea osteoporótica foi verificada após 12 semanas, podendo ser iniciada a cirurgia de defeito primário da tíbia.
2,5,2. Defeito Proximal de Tíbia
Protocolo anestésico durante a cirurgia seguiu a metodologia da cirurgia OVX.
Defeitos proximais bilaterais da tíbia foram feitos em todos os ratos utilizando o procedimento cirúrgico padrão. Ambos os membros foram isolados, raspados e desinfetados com iodo vet (Kruuse Vet, Dinamarca) e etanol a 70%. Incisão acentuada e exploração romba apresentaram o lado medial da tíbia proximal, onde um defeito cilíndrico de 2,8mm e profundidade de 3mm até a concha cortical oposta foram criados com base nos resultados de um estudo piloto. A cirurgia para o grupo de aloenxertos foi realizada primeiramente, devido à coleta de auto-enxertos de ambas as pernas. No total, 48 defeitos cilíndricos foram criados e preenchidos com auto-enxerto ou aloenxerto programado por randomização. A ferida foi fechada em duas camadas com sutura 4.0. No pós-operatório, os ratos foram analgesizados com buprenorfina (Temgesic, RB Pharmaceuticals Limited, Berkshire, UK), 0,2 ml/100 g de peso corporal s.c. em intervalos de 8 horas por 4 dias.
2,6. Micro-CT Scanning e Microarchitectural Analysis
As regiões proximais bilaterais da tíbia foram digitalizadas in vivo com um sistema microtomográfico de alta resolução (vivaCT 40, Scanco Medical AG, Brüttisellen, Suíça).
O escaneamento micro-CT in vivo para avaliação do desenvolvimento do crescimento ósseo em ratos normais e osteoporóticos foi realizado nos 4 pontos de tempo seguintes: no dia anterior à cirurgia (dia 0) e depois nos 7, 12 e 21 dias de pós-operatório.
Outras vezes, para verificar o modelo de indução da osteoporose, foi realizada uma avaliação longitudinal em 3 pontos de tempo: (1) antes da cirurgia OVX para estabelecer uma linha de base de densidade mineral óssea (dia 90), (2) antes da cirurgia da tíbia (dia 7), e (3) após a cirurgia da tíbia (dia 0).
Durante o escaneamento in vivo, os ratos foram anestesiados por isoflurano em um sistema de caixa fechada, 1 L/min de oxigênio e 4 ml/min de isoflurano (IsoFlo vet, Abbott Laboratories Ltd, Berkshire, Inglaterra) por 6 minutos, com regulação de acordo com os reflexos do rato. Após sedação completa, os ratos foram colocados em um leito de animais cobertos com uma máscara com suprimento de oxigênio e isoflurano de acordo com o protocolo. A área de interesse foi fixada para uma varredura precisa. As imagens foram escaneadas em alta resolução resultando em uma reconstrução 3D com voxel de tamanho μm3 ( pixels) para 500 fatias para avaliação representativa de cada área com defeito. O tempo de varredura para cada espécime foi de 30 minutos.
Os parâmetros especificados por este escaneamento incluíram propriedades microarquitetônicas do osso trabecular para a confirmação da indução da osteoporose e efeito de melhora óssea dos enxertos . Isso incluiu volume ósseo/volume de tecido (BV/TV), índice de modelo de estrutura, densidade de conectividade (CD), espessura trabecular (TbTh), separação trabecular (Tb.Sp), grau de anisotropia (DA), densidade da superfície óssea, relação superfície/volume ósseo (BS/TV), densidade aparente e densidade do material.
2,7. Histologia e Histomorfometria
21 dias após a cirurgia, os ratos foram escaneados e sacrificados com pentobarbital em overdose, de acordo com o protocolo de licença animal. As tíbias proximais bilaterais, incluindo material de enxerto e osso, foram fixadas em formaldeído (4%) e trocadas por solução salina fosfatada (PBS). Após a desidratação e descalcificação, as amostras foram fixadas e incluídas em parafina. As amostras foram seccionadas em 3 fatias consecutivas com uma espessura de 3-4 μm e separação de 500 μm. Todas as 3 secções foram coradas com hematoxilina e eosina (H&E).
A região de interesse (ROI) para histomorfometria foi caracterizada como a área original do defeito tibial comparada entre o auto-enxerto e o aloenxerto (Figura 2). Dentro do ROI pré-definido, as frações de volume foram calculadas pelo princípio de Cavalieri usando software estereológico verificado (newCast Visiopharm, Dinamarca) para contagem de pontos, com 300-600 acessos por seção com o microscópio Olympus BX 51 (Ballerup, Dinamarca) .
O tecido dentro do ROI das seções manchadas pelo HE foi classificado como osso, tecido fibroso, diversos, músculo ou medula. O volume ósseo foi calculado como a quantidade de acessos ósseos dividida com o total de acessos e declarada em porcentagem.
2,8. Análise estatística
Duas amostras de ANOVA bicaudal e unidirecional foram utilizadas para comparar possíveis diferenças entre os grupos com GraphPad Prism v. 7 (GraphPad Software, Inc.). Um valor inferior a 5% foi considerado significativo.
O tamanho da amostra incluiu pelo menos 10 defeitos para cada enxerto. Optamos por incluir 12 ratos em cada grupo, devido ao risco de desistência. O erro de cálculo do primeiro tipo foi ajustado para 1,96/95% e o erro do segundo tipo para 0,84, devido à potência selecionada de 80%. A diferença mínima relevante e o desvio padrão foram ambos definidos para 70% .
3. Resultados
3,1. Observação Animal
No total, quatro dos 24 ratos morreram durante as 3 semanas de pós-operatório, consistindo de 2 de cada grupo. Três deles morreram como resposta à anestesia durante o exame de micro-TC in vivo, e um morreu devido a uma infecção. Os demais ratos foram incluídos no estudo. Durante o período de observação do experimento, os animais foram observados diariamente por um técnico em animais ou pelo pesquisador por quaisquer sinais de desconforto ou violação da licença do animal. Nenhuma alteração de peso significativa foi observada em ambos os grupos após a cirurgia de defeito na tíbia. Os ratos expostos ao OVX ganharam peso durante as primeiras 12 semanas de g a g ().
3.2. Propriedades Microarquitetônicas Tridimensionais
3.2.1. Indução da Osteoporose em Ratos
Após 12 semanas, os ratos tratados com OVX tiveram uma diminuição na fração de volume ósseo, densidade de conectividade, densidade superficial óssea e densidade aparente () comparada ao osso normal. O índice do modelo de estrutura aumentou da placa típica, -1,4, para a haste típica, 3,3. A separação trabecular, o grau de anisotropia, a densidade do material e a relação superfície/volume ósseo aumentaram (). A espessura trabecular não apresentou nenhuma alteração significativa () (Tabela 1).
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3.2.2. Alterações Microarquitectónicas com Auto-enxerto e Tratamentos Alograft
(1) Alterações na Microarquitectura em Osso Normal. BV/TV foi diminuído nos defeitos do aloenxerto em relação ao auto-enxerto nos dias 0, 7, e 14 (). Entretanto, no dia 21, não houve diferença estatística entre os dois grupos (Figura 3). Reconstruções 3D representativas das imagens de micro-TC foram mostradas na Figura 4.
(a)
(b)
(a)
(b)
A mesma tendência aplicada ao tecido de conectividade com valor reduzido nos dias 0, 7 e 14 () mas sem diferença no dia 21. A espessura trabecular foi aumentada em todos os pontos do tempo nos grupos de aloenxertos () e nenhuma diferença no grau de anisotropia (Figura 3).
(2) Mudanças na Microarquitetura do Osso Osteoporótico. BV/TV do osso osteoporótico apresentou diminuição do osso no grupo do aloenxerto nos dias 0, 7 e 14 () e nenhuma diferença após 21 dias (Figuras 4 e 5).
Espessura trabecular foi significativamente maior no grupo do auto-enxerto nos dias 0, 14 e 21 () mas sem diferença no dia 7. A densidade de conectividade e o grau de anisotropia não tiveram diferença significativa em nenhum ponto do tempo (Figura 5).
3.3. Histologia e Histomorfometria
3.3.1. Histologia
Nova formação óssea foi observada na área do defeito em todas as amostras. Não foi possível distinguir a diferença entre os restos de enxerto e osso novo, enquanto que o volume ósseo total dentro da área do defeito foi calculado como osso dentro do ROI (Figura 1, T3).
3.3.2. Histomorfometria
Volume ósseo não mostrou diferença significativa entre os grupos auto-enxerto e aloenxerto dentro do osso normal e osteoporótico. Ao comparar o auto-enxerto e o aloenxerto do osso normal com o auto-enxerto e o aloenxerto do osso osteoporótico, houve diminuição significativa da quantidade de osso aos 21 dias de avaliação ().
A média de formação de osso novo incluindo o material do enxerto no defeito do osso normal foi de 53% para o auto-enxerto, enquanto que 51% para o aloenxerto. No osso osteoporótico, o aloenxerto teve o maior volume ósseo com média de 35%, enquanto o auto-enxerto teve 33% (Figura 6). Não houve diferença significativa entre quaisquer outros parâmetros medidos dentro do defeito ().
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4. Discussão
Este estudo comparou os efeitos do auto-enxerto e do aloenxerto num modelo de rato com defeito tibial para a melhor reparação do defeito em ossos normais e osteoporóticos. A hipótese era de que não haveria diferença na formação óssea utilizando o auto-enxerto ou o aloenxerto, seja ele utilizado em osso normal ou osteoporótico. Os resultados do micro-TC ou histomorfometria não mostraram diferença significativa no uso de auto-enxerto e aloenxerto em defeito ósseo tibial após 21 dias de observação, nem nas estruturas ósseas normais nem nas osteoporóticas. Entretanto, os exames de micro-TC mostraram uma diminuição da quantidade de osso novo no grupo do aloenxerto em 0, 7 e 14 dias.
Quando os estudos comparam suas invenções, há alguma discordância se o auto-enxerto ou o aloenxerto deve servir como o padrão dourado. A diferença é principalmente entre as opiniões acadêmicas e clínicas e que tipo de defeito é utilizado no estudo. Fazendo uma comparação dentro do mesmo modelo, uma informação valiosa pode ser obtida para o propósito acadêmico e para aplicação clínica, especialmente, devido ao crescente foco em materiais substitutos para superar os desafios no uso de materiais de enxerto e suas limitações .
Ao avaliar os resultados deste estudo, deve-se notar que tanto em ossos normais quanto em osteoporóticos, o BV/TV no micro-CT scan é significativamente menor no grupo do aloenxerto no dia 0, o que poderia ser devido ao processo de preenchimento do defeito. O aloenxerto foi obtido de osso normal e o auto-enxerto do mesmo animal com osso normal ou osteoporótico. A espessura trabecular é menor no grupo do auto-enxerto no osso normal, mas maior no osso osteoporótico. Em teoria, isto deveria ter sido com resultados opostos aos da diminuição da densidade do osso osteoporótico. No entanto, poderia ser pelo efeito do moinho ósseo e pelo tamanho e mobilidade dos chips. O aspecto interessante é que o desenvolvimento do dia 0 ao dia 21 é mais rápido no grupo do aloenxerto com aumento de 65,8% contra apenas 16,4% de aumento no grupo do auto-enxerto. No 21º dia, não há diferença entre o auto-enxerto e o aloenxerto quantificado por histomorfometria ou análise microarquitetônica.
Histomorfometria revelou no 21º dia uma diminuição da formação óssea geral ao tentar utilizar materiais de enxerto no osso osteoporótico (Figura 6). Novamente, deve-se notar que o aloenxerto é de um doador saudável e, ainda assim, proporciona uma regeneração significativamente menor do que a do osso normal. Isto enfatiza perfeitamente a necessidade de testar materiais de enxerto ou dispositivos médicos no osso osteoporótico para poder avaliar a sua eficácia total. Entretanto, esse teste de material de enxerto tanto em tecidos ósseos normais quanto em osteoporóticos parece faltar em potencial regenerativo.
Indução da osteoporose em modelo de rato foi previamente verificada, com uma ilustração da importância da observação até a indução. Kinney et al. investigaram as alterações no osso trabecular devido ao OVX e constataram que o procedimento OVX leva a uma diminuição imediata e contínua do osso trabecular e, após 50 dias, os ratos OVX haviam perdido 50% do seu volume ósseo sem efeito rebote. Campbell et al. estabeleceram um curso temporal longitudinal detalhado da perda óssea no modelo OVX em doze semanas. Os resultados deste estudo indicam que as alterações microarquitetônicas ocorrem nas primeiras 12 semanas após o OVX no modelo de rato. Assim, com a observação de 21 dias, não há expectativas de um efeito de ricochete.
O conhecimento atual no uso de aloenxertos e auto-enxertos é que os estudos verificam diferentes resultados dependendo da localização. Nas cranioplastias, o aloenxerto mostrou-se superior; no ligamento crucial anterior (LCA), o auto-enxerto mostrou melhor efeito na formação óssea, enquanto que no ligamento crucial posterior (LCP), os resultados são iguais entre os 2 enxertos. Portanto, ao comparar resultados para a implementação clínica, o uso do enxerto correto é essencial para as comparações corretas. Resultados ótimos serão obtidos com o uso dos dois enxertos tanto para os controles positivos quanto para os negativos. Isto fará com que o impacto clínico seja maior e fornecerá resultados convincentes.
Quando se enfrenta uma implementação clínica, é necessário, além disso, focar em um resultado econômico e relacionado ao paciente. O custo do uso do auto-enxerto é relatado como sendo menor, por exemplo, em cirurgias de LCA, mas o possível efeito colateral na colheita do auto-enxerto está associado a efeitos colaterais bastante severos. Isso dá o dilema para a escolha da metodologia na colheita do auto-enxerto, mas requer ainda mais a necessidade de outro substituto para substituir ambos os materiais do enxerto. A atual engenharia de tecidos e biomateriais com células-tronco pode fornecer uma nova esperança para a regeneração óssea.
Os pontos fortes deste estudo são o modelo padronizado de defeito da tíbia em ratos e a indução bem-verificada da osteoporose. No entanto, nada neste trabalho se baseia em resultados anteriores, e a indução da osteoporose é verificada pelo mesmo scanner que avalia os resultados nos grupos de intervenção. Isto significa que a confiabilidade dos resultados deste estudo aumenta. Além disso, os resultados e os mesmos métodos são testados em diferentes tipos de estrutura óssea, permitindo a melhor comparação do material do enxerto, especialmente porque o aloenxerto em osso normal e osteoporótico é do mesmo doador.
Limitações são a ausência de um defeito vazio que poderia demonstrar a eficácia básica do potencial regenerativo ósseo sem enxertos ósseos tanto em osso normal como osteoporótico. Entretanto, o foco deste estudo é comparar as potenciais eficácias entre os materiais dos enxertos e não de acordo com uma linha de base específica para o modelo de desenho. Outra limitação é a diferença significativa no dia 0 entre os grupos. Mas quando a avaliação é limitada a 21 dias e o aloenxerto consegue fornecer os mesmos resultados em tão pouco tempo e, portanto, os resultados são validados neste modelo.
5. Conclusão
Este estudo conclui que o auto-enxerto e o aloenxerto têm capacidades semelhantes de formar ossos com uma observação de 21 dias em um defeito tibial de rato em um modelo de rato, sugerindo que o aloenxerto poderia ser uma boa alternativa ao aloenxerto. Além disso, a cirurgia OVX para indução de osteoporose duradoura no modelo de rato é um método viável.
Dados disponíveis
Os dados para este estudo foram analisados por histomorfometria e todos os dados são armazenados no Laboratório de Pesquisa Ortopédica, Departamento de Ortopedia & Traumatologia, Hospital Universitário Odense, Instituto de Pesquisa Clínica, Universidade do Sul da Dinamarca em arquivos de dados da VisioPharm, Dinamarca, verificando cada contagem e estatística feita para as análises incorporadas neste estudo. Micro-CT scans são arquivos grandes armazenados em fitas de TB. Todos os dados utilizados para apoiar os resultados deste estudo estão disponíveis do autor correspondente mediante solicitação.
Conflitos de interesse
Autores não declaram conflito de interesse.
Conhecimento
Gostaríamos de agradecer ao pessoal do Laboratório Biomédico da Universidade do Sul da Dinamarca, especialmente a Anne Mette Durand, pela partilha de conhecimentos. Além disso, Gitte Højlund Reinberg é reconhecida pelo apoio durante todo o estudo. Este estudo é gentilmente apoiado pelo Conselho Dinamarquês de Pesquisa em Saúde (SSVF22-04-0705, MD).